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技術(shù)文章

超微量分光光度計使用方法


超微量分光光度計
超微量分光光度計
是一種用于檢測核酸、蛋白質(zhì)等生物分子濃度的高精度儀器,具有樣品用量少、操作便捷等優(yōu)點。以下是其標(biāo)準使用方法:

一、使用前準備
儀器預(yù)熱
打開儀器電源,預(yù)熱15-30分鐘,確保儀器達到穩(wěn)定工作狀態(tài)。
樣品準備
核酸樣品需溶解于無核酸酶的水或TE緩沖液中,濃度建議控制在2-2000 ng/μL(dsDNA)范圍內(nèi)。
蛋白質(zhì)樣品需根據(jù)類型(如BSA)選擇合適的緩沖液,濃度建議0.1-15 mg/mL。
樣品需充分混勻,避免氣泡或沉淀。
清潔檢測平臺
使用無塵紙或?qū)S们鍧嵅颊喝?0%乙醇,輕輕擦拭上下檢測臂表面,確保無灰塵、指紋或殘留物。
二、操作步驟
空白調(diào)零
吸取1-2 μL空白溶液(與樣品溶劑一致)滴加至檢測平臺中央。
放下上檢測臂,點擊“Blank”鍵進行空白校準,等待儀器自動完成調(diào)零。
調(diào)零完成后,用無塵紙吸去空白溶液。
樣品檢測
吸取1-2 μL樣品滴加至檢測平臺同一位置。
放下上檢測臂,點擊“Measure”鍵開始檢測。
儀器自動顯示吸光度值(如A260、A280)、濃度及純度比值(如A260/A280)。
記錄數(shù)據(jù)后,用無塵紙吸去樣品,避免交叉污染。
連續(xù)檢測
若需檢測多個樣品,重復(fù)步驟2,每次檢測前需用無塵紙清潔檢測平臺。
三、注意事項
樣品濃度
若樣品濃度超出儀器量程,需稀釋后重新檢測,并乘以稀釋倍數(shù)計算實際濃度。
檢測環(huán)境
避免強光直射或劇烈震動,確保儀器處于水平、穩(wěn)定的工作臺面。
維護保養(yǎng)
每次使用后清潔檢測平臺,長期不用時關(guān)閉電源。
定期校準儀器(建議每3-6個月),使用標(biāo)準品驗證準確性。
避免使用有機溶劑(如丙酮)清潔儀器,以防損壞光學(xué)部件。
四、結(jié)果解讀
核酸純度:A260/A280比值在1.8-2.0之間為純度較高,低于1.8可能含蛋白質(zhì)污染,高于2.0可能含RNA或酚類雜質(zhì)。
蛋白質(zhì)純度:A280為蛋白質(zhì)主要吸收峰,需結(jié)合其他方法(如電泳)綜合判斷純度。
通過規(guī)范操作,可確保超微量分光光度計的檢測精度和重復(fù)性,為科研實驗提供可靠數(shù)據(jù)支持。
 
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